果實(shí)/種子總RNA快速提取試劑盒 核酸提取
適用于快速提取果實(shí)、種子、中草藥的總 RNA，gDNA 過(guò)濾器能高效濾除 gDNA， RNA 可直接用于 RT、RT-PCR、RT-qPCR、普通轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、RACE、芯片等。果實(shí)/種子總RNA快速提取試劑盒 核酸提取
果實(shí)/種子總 RNA 提取試劑盒
Fruit / Seed Total RNA Mini Kit
果實(shí)/種子總RNA快速提取試劑盒 核酸提取
目錄號(hào)：91513
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 91513-50（50 次） |
裂解液 FSL | 50 ml |
裂解液 ARL | 25 ml |
去蛋白液 RW1 | 40 ml |
漂洗液 RW | 10 ml（需加入指ding量無(wú)水乙醇） |
RNase-Free H2O | 5 ml |
gDNA 過(guò)濾器和收集管 | 50 套 |
RNA 吸附柱和收集管 | 50 套 |
RNase-Free 1.5ml 離心管 | 50 支 |
保存條件
室溫（15 ~ 25℃），有效期 12 個(gè)月。
自備試劑
無(wú)水乙醇，β-巰基乙醇
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
適用于快速提取果實(shí)、種子、中草藥的總 RNA，gDNA 過(guò)濾器能高效濾除 gDNA， RNA 可直接用于 RT、RT-PCR、RT-qPCR、普通轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、RACE、芯片等。
成功案例：稻谷種子、玉米種子、小麥種子、葡萄果實(shí)、板栗、櫻桃、草莓、芒果、百合鱗莖、唐菖蒲的球莖、中草藥的塊根...
如果遇到果實(shí)、種子、中草藥，例如：多糖多酚巨高的作物種子（小麥/玉米/大豆/水稻）、葡萄果實(shí)、藍(lán)莓果實(shí)、百合鱗莖、土豆塊莖；或者次級(jí)代謝產(chǎn)物巨豐富的葛根、虎杖、雪蓮等藥用植物，請(qǐng)選擇 91513-果實(shí)種子總RNA 提取試劑盒。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 高質(zhì)：28s/18s=2:1，OD260/280=2.0～2.2！
2. 高效：提取全過(guò)程僅需 30min！
注意事項(xiàng)
1. 如果 FSL 有析出或者沉淀，請(qǐng)將其置于 65℃水浴中，重新溶解后使用。
2. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會(huì)影響 RNA 的提取得率和質(zhì)量。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)
操作步驟：
重要提示：
① 第一次使用前請(qǐng)先在漂洗液 RW 中加入無(wú)水乙醇，加入量詳見(jiàn)瓶身標(biāo)簽。
② 操作前，取1ml裂解液 FSL至2.0ml離心管內(nèi)，加入5%的β-巰基乙醇
（例如：1ml FSL加50μl β-巰基乙醇），顛倒混勻后，65℃水浴中預(yù)熱。多個(gè)樣本按比例放大準(zhǔn)備。
③ β-巰基乙醇是裂解液FSL的關(guān)鍵成分，必要的時(shí)候可以提高終濃度到10～20%，來(lái)防止樣品褐化。如果碰到特別復(fù)雜的植物，可以嘗試在裂解液中再加入PVP40至終濃度2%。
④ 所有離心步驟均需要在室溫（15℃～25℃）下進(jìn)行。
1. 材料處理：
a．將植物樣本在液氮中迅速研磨成細(xì)粉。
b．轉(zhuǎn)移 30～200 mg 細(xì)粉至 65℃預(yù)熱的裂解液 FSL（已加有 β-巰基乙醇）中，立即劇烈渦旋震蕩 30 Sec，充分混勻。
注意：水分多的樣品（如草莓、西瓜果肉）投入 150～200 mg； 水分含量少的樣品（如成熟的小麥/玉米/大豆種子）投入 30～40 mg； 淀粉含量高的塊莖投入 40～80mg；葉片投入 50～100 mg。
c．短暫回放至65℃水浴5min，中間偶爾顛倒1～2次，幫助裂解。
d．將裂解物13,000rpm 離心5 ~10min，沉淀不能裂解的碎片。
e．轉(zhuǎn)移上清（約 800~900μl）至新的2.0ml離心管中，加入0.5倍體積的無(wú)水乙醇（約400~450μl），吹打混勻。
2. 每次轉(zhuǎn)移≤750μl上清混合液至gDNA過(guò)濾器中（過(guò)濾器放入收集管），13,000rpm離心2min，倒棄濾液。重復(fù)此過(guò)程，直到混合液全部轉(zhuǎn)入gDNA 過(guò)濾器。此時(shí)，絕大部分 gDNA 被濾除，RNA和少量gDNA殘留被吸附在膜上。
3. 取出步驟2的gDNA過(guò)濾器，放入一個(gè)新的2.0ml離心管中，加入500μl 裂解液 ARL，13,000rpm 離心30sec，收集濾液（RNA在濾液中），向?yàn)V液中加入250μl無(wú)水乙醇，吹打混勻。
4. 將濾液混合物加入RNA吸附柱中，13,000 rpm 離心2 min，倒棄濾液。此時(shí)，RNA被吸附在膜上。
5. 加入700μl去蛋白液 RW1，室溫放置1min，13,000 rpm 離心30sec，倒棄濾液。
6. 加入500μl 漂洗液 RW，13,000 rpm 離心 30 sec，倒棄濾液。
7. 重復(fù)步驟6一次。
8. 將RNA吸附柱放回空收集管中，13,000 rpm 離心2 min，除去膜上殘留的乙醇。
9. 取出RNA吸附柱，放入 RNase-free1.5 ml 離心管中，向 RNA 吸附膜的中央懸空滴加 30~50μl的RNase-free H2O，室溫放置 1 min，13,000 rpm 離心1min。
10. 提取的總RNA，可直接用于下游實(shí)驗(yàn)，或于-70℃保存，以免降解。
相關(guān)產(chǎn)品：
71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）
71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）
71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有qPCR儀
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