Oxoid山li醇麥康凱瓊脂，改良TSB,EC肉湯等
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：產(chǎn)品品牌：Oxoid產(chǎn)品名稱：山li醇麥康凱瓊脂CM0813B,CM0981B,改良TSB CM0989B,EC肉湯CM0853B等品貨號(hào)：CM0813B/CM0981B/CM0989B/CM0853B產(chǎn)品規(guī)格：500gOxoid山li醇麥康凱瓊脂，改良TSB,EC肉湯等
Oxoid山li醇麥康凱瓊脂CM0813B,CM0981B,改良TSB CM0989B,EC肉湯CM0853B等
英國(guó)Oxoid產(chǎn)品范圍闊及與疾病、微生物診斷相關(guān)的臨床檢驗(yàn)科學(xué)、基礎(chǔ)學(xué)術(shù)研究與工業(yè)生產(chǎn)領(lǐng)域。
Oxoid山li醇麥康凱瓊脂CM0813B,CM0981B,改良TSB CM0989B,EC肉湯CM0853B等，產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
產(chǎn)品品牌：Oxoid
產(chǎn)品名稱：山li醇麥康凱瓊脂CM0813B,CM0981B,改良TSB CM0989B,EC肉湯CM0853B等
產(chǎn)品貨號(hào)：CM0813B/CM0981B/CM0989B/CM0853B
產(chǎn)品規(guī)格：500g
Oxoid山li醇麥康凱瓊脂，改良TSB,EC肉湯等
產(chǎn)品說(shuō)明：
大腸桿菌O157的培養(yǎng)基：
山li醇麥康凱瓊脂 CM0813B
山li醇麥康凱瓊脂(含BCIG) CM0981B
EC肉湯(減少膽鹽) CM0990B
改良胰蛋白胨大豆肉湯 CM0989B
頭bao克肟鼠李糖山li醇麥康凱瓊脂 CM1005B
EC肉湯 CM0853B
EC肉湯（含MUG） CM0979B
干粉培養(yǎng)基10-30℃保存
山li醇麥康凱瓊脂 (Sorbitol MacConkey Agar)
培養(yǎng)大腸桿菌O157的選擇性培養(yǎng)基
貨號(hào) | 產(chǎn)品描述 | 規(guī)格 | 可配制培養(yǎng)基 |
CM0813B | 山li醇麥康凱瓊脂 Sorbitol MacConkey Agar | 500g | 9.7L |
CM0813R | 2.5kg | 48.5L | |
CM0813K | 25kg | ||
SR0172E | C-T添加劑，Cefixime-Tellurite Supplement | 10小瓶 | 每小瓶配500ml |
SR0172H | 10小瓶 | 每小瓶2.0L | |
CM0981A | 山li醇麥康凱瓊脂(含BCIG) Sorbitol MacConkey Agar with BCIG | 100g | 1.94L |
CM0981B | 500g | 9.7L | |
CM1005B | 頭bao克肟鼠李糖山li醇麥康凱瓊脂基礎(chǔ) | 500g | 8.8L |
SR0191E | 頭bao克肟添加劑 Cefixime Supplement | 10小瓶 | 每小瓶500ml |
山li醇麥康凱瓊脂 CM0813
配方表：
成分* | 含量 g/L |
蛋白胨 | 20.0 |
山li醇 | 10.0 |
3號(hào)膽鹽 | 1.5 |
*化鈉 | 5.0 |
酚紅 | 0.03 |
結(jié)晶紫 | 0.001 |
瓊脂 | 15.0 |
pH 7.1±0.2 @25℃ |
*可根據(jù)操作標(biāo)準(zhǔn)自行調(diào)整配方
C-T添加劑 SR0172E
成分 | 每小瓶含 | 每升培養(yǎng)基含 |
亞碲酸鉀 | 1.25mg | 2.5mg |
頭bao克肟 | 0.025mg | 0.05mg |
制備方法：
取51.5g培養(yǎng)基至1L蒸餾水中，煮沸至wan全溶解，121℃高壓滅菌15分鐘，冷卻至50℃，混勻倒入無(wú)菌培養(yǎng)皿。
如果需要的話，根據(jù)SR0172的產(chǎn)品說(shuō)明進(jìn)行溶解，每500ml培養(yǎng)基加入1瓶SR0172E，加入冷卻后的培養(yǎng)基中，混勻后再倒平板。
產(chǎn)品描述：
大腸桿菌O157被認(rèn)為是出血性結(jié)腸炎的一個(gè)病因，是出血性腹瀉、嚴(yán)重的腹部疼痛、溶血性尿毒癥的病理特征菌。因此，它是一個(gè)特別重要的人病原體。
山li醇麥康凱瓊脂可以用來(lái)提取病理大腸桿菌O157.它的配方是由Rappaport and Henig的描述基礎(chǔ)上而來(lái)，是根據(jù)3號(hào)麥康凱瓊脂改變的，將其中的乳糖變?yōu)榱松絣i醇。大腸桿菌O157不發(fā)酵山li醇，因此產(chǎn)生無(wú)色菌落。相比之下，大部分的大腸桿菌發(fā)酵山li醇，形成粉色菌落。山li醇麥康凱瓊脂的有效性被March and Ratnam做過(guò)確認(rèn)實(shí)驗(yàn)，他們的文章得出99.99%的靈敏度和85%的特異性，所以認(rèn)為這款培養(yǎng)基是一款簡(jiǎn)單地，不昂貴的，快速的，可信的大腸桿菌O157的篩選培養(yǎng)基。
Chapman等人在山li醇麥康凱瓊脂中添加頭bao克肟和亞碲酸鉀，以增加培養(yǎng)基的選擇性。這種濃度的亞碲酸鉀將O157血清型與其他血清型區(qū)分出來(lái)，并抑制普羅威登斯菌和嗜水氣單胞菌，頭bao克肟抑制變形桿菌屬。
在山li醇麥康凱瓊脂中添加頭bao克肟和亞銻酸鉀的方法再FDA 細(xì)菌學(xué)分析手冊(cè)中有描述。
培養(yǎng)基35℃培養(yǎng)24小時(shí)，避免過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的培養(yǎng)。
可使用大腸桿菌O157乳膠凝集試劑盒DR0620，來(lái)快速鑒定可疑的O157菌落。
保存：
干粉培養(yǎng)基10-30℃保存，SR0172在0℃以下保存，效期之前使用。制成培養(yǎng)基在2-8℃保存，避免光的照射，最多保存2周。
山li醇麥康凱瓊脂(含BCIG) CM0981
含有5-*-4-*-3-吲哚-β-D-葡萄糖苷酸(BCIG)
配方表：
成分* | 含量 g/L |
蛋白胨 | 20.0 |
山li醇 | 10.0 |
3號(hào)膽鹽 | 1.5 |
*化鈉 | 5.0 |
酚紅 | 0.03 |
結(jié)晶紫 | 0.001 |
瓊脂 | 15.0 |
5-bromo-4-chloro-3-indolyl-b-D-glucuronide(BCIG) | 0.1 |
pH 7.1±0.2 @25℃ |
*可根據(jù)操作標(biāo)準(zhǔn)自行調(diào)整配方
制備方法：
取51.6g培養(yǎng)基至1L蒸餾水中，混勻，121℃高壓滅菌15分鐘，混勻倒入無(wú)菌培養(yǎng)皿。
產(chǎn)品描述：
含有BCIG的山li醇麥康凱瓊脂（SMAC）含有兩種大腸桿菌O157的選擇性因子：對(duì)山li醇的不發(fā)酵，β-葡萄糖苷酶的活性的出現(xiàn)。在一次對(duì)人工污染的肉類樣品的測(cè)試中，含有BCIG的SMAC將大腸桿菌O157的失敗檢出的概率下降了36%。
這款培養(yǎng)基中的5-*-4-*-3-吲哚-β-D-葡萄糖苷酸(BCIG)是β-葡萄糖苷酶的底物，這種酶并不在O157大腸桿菌中常見(jiàn)。非發(fā)酵山li醇，以及β-葡萄糖苷酶陰性的大腸桿菌O157生成麥色菌落。具有β-葡萄糖苷酶的微生物將分解BCIG底物，形成吲哚酚（或鹵代酚），迅速形成不溶性染料或其類似物，導(dǎo)致明顯的藍(lán)綠色菌落。
在35-37℃培養(yǎng)24小時(shí)，查看麥色菌落，可以使用大腸桿菌O157乳膠凝集試劑盒DR0620或DR0102對(duì)可疑菌落進(jìn)行確認(rèn)。
大腸桿菌O157一般不發(fā)酵山li醇，并且是β-葡萄糖苷酶陰性，因此形成無(wú)色菌落。大部分大腸桿菌其他血清型是β-葡萄糖苷酶陽(yáng)性，可以發(fā)酵山li醇，因此出現(xiàn)藍(lán)色至紫色菌落。
如果高含量的革蘭氏陰性菌需要被抑制，可以加入Cefixime-Tellurite (CT) Selective Supplement SR0172增加選擇性。
SMAC with BCIG是一種 USDA/FSIS 認(rèn)可的培養(yǎng)基，用來(lái)預(yù)鑒定Escherichia coli O157:H7/NM
質(zhì)控菌株：
Escherichia coli O157:H7 (glucuronidase-negative) NCTC12900生長(zhǎng)良好，無(wú)色菌落
Escherichia coli (glucuronidase-positive) ATCC® 25922生長(zhǎng)良好，藍(lán)色/紫色菌落
Enterococcus faecalis ATCC® 19433 被抑制
頭bao克肟鼠李糖山li醇麥康凱瓊脂基礎(chǔ) CM1005
CR-SAMC Agar Base，與SR0191E配成CR-SAMC Agar
配方表：
成分* | 含量 g/L |
蛋白胨 | 20.0 |
山li醇 | 10.0 |
3號(hào)膽鹽 | 1.5 |
*化鈉 | 5.0 |
鼠李糖 | 5.0 |
酚紅 | 0.03 |
結(jié)晶紫 | 0.001 |
瓊脂 | 15.0 |
pH 7.1±0.2 @25℃ |
*可根據(jù)操作標(biāo)準(zhǔn)自行調(diào)整配方
SR0191E：每小瓶含0.025mg頭bao克肟，在每升培養(yǎng)基中加入0.05mg頭bao克肟。
制備方法：
取28.25g培養(yǎng)基至500ml蒸餾水中，混勻后121℃高壓滅菌15分鐘。冷卻到50℃，加入已經(jīng)按照說(shuō)明書(shū)溶解的1瓶SR0191E（每小瓶加入2ml無(wú)菌水），混勻后倒平板。
產(chǎn)品描述：
在山li醇麥康凱瓊脂SMAC中加入鼠李糖，增加了大腸桿菌O157在背景菌種的區(qū)分度。大約60%的不發(fā)酵山li醇的大腸桿菌血清型（O157血清型除外）會(huì)發(fā)酵鼠李糖。頭bao克肟的存在降低了競(jìng)爭(zhēng)菌的數(shù)量，特別是變形桿菌屬，它在非山li醇發(fā)酵菌中經(jīng)常占了很大的比重。
大腸桿菌O157一般不發(fā)酵山li醇和鼠李糖，所以產(chǎn)生麥色菌落。但是，大部分不發(fā)酵山li醇的其他血清型大腸桿菌發(fā)酵鼠李糖，這些菌落為紅色或粉色。
CR-SCAM與選擇性更強(qiáng)的CT-SACM聯(lián)用，可以使增菌肉湯中的大腸桿菌O157的恢復(fù)率更高。
培養(yǎng)基在35-37℃培養(yǎng)24小時(shí)
改良胰蛋白胨大豆肉湯 (Tryptone Soya Broth Modified, mTS)
用于培養(yǎng)大腸桿菌O157的選擇性增菌肉湯，可以添加合適的添加劑增加選擇性
貨號(hào) | 產(chǎn)品描述 | 規(guī)格 | 可配制培養(yǎng)基 |
CM0989B | 改良胰蛋白胨大豆肉湯基礎(chǔ) | 500g | 15.2L |
SR0181E | 新生霉素添加劑 Novobiocin Supplement | 10小瓶 | 每小瓶配500ml |
SR0190A | VCC選擇性添加劑 VCC Selective Supplement | 10下小瓶 | 每小瓶225ml |
改良胰蛋白胨大豆肉湯基礎(chǔ) CM0989
配方表：
成分* | 含量 g/L |
酪蛋白yi酶消化物 | 17.0 |
大豆粉木瓜酶消化物 | 3.0 |
*化鈉 | 5.0 |
磷酸qing二鉀 | 4.0 |
葡萄糖 | 2.5 |
膽鹽 | 1.5 |
pH 7.4±0.2 @25℃ |
*可根據(jù)操作標(biāo)準(zhǔn)自行調(diào)整配方
SR0190A VCC選擇性添加劑：
成分 | 每瓶含 | 每900ml培養(yǎng)基含 | 每升培養(yǎng)基含 |
萬(wàn)古mei素 | 1.8mg | 7.2mg | 8.0mg |
頭bao克肟 | 0.01125mg | 0.045mg | 0.05mg |
頭孢磺啶 | 2.25mg | 9.0mg | 10.0mg |
SR0181E：每小瓶10mg萬(wàn)古mei素，每小瓶配500ml培養(yǎng)基。
制備方法：
取33g改良TSB至1L蒸餾水中，混勻，分裝支最終容器中，121℃高壓滅菌15分鐘，冷卻至50℃后添加所需的添加劑。
產(chǎn)品描述：
mTSB是一種營(yíng)養(yǎng)豐富的選擇性肉湯基礎(chǔ)，可以37℃震蕩培養(yǎng)24小時(shí)，也有人43℃攪拌培養(yǎng)，使食品樣品中的恢復(fù)率更佳。
緩沖蛋白胨水CM0509，添加SR0190，用來(lái)從牛肉的尸體，牛的糞便和牛奶和碎牛肉中提取大腸桿菌O157；
由SR0190E添加到CM0989中，組成EHEC enrichment broth (EEB)，克服了有些大腸桿菌O157的抗生素抗性。
Both BPW-VCC (CM0509+SR0190) and EEB (CM0989+SR0190) are incubated for 6hr at 37°C
Tryptone Soya Broth (CM0129)可以通過(guò)增加一些成分變?yōu)?span>CM0989，添加4g/L的磷酸二氫鉀，以及1.5g/L的膽鹽。膽鹽抑制孢子和腸球菌屬，但能使大腸桿菌O157生長(zhǎng)。VCC選擇性添加劑含有三種抗生素，萬(wàn)古mei素抑制革蘭氏陽(yáng)性菌，頭bao克肟抑制變形桿菌，頭孢磺啶抑制假單胞菌。
EC 肉湯 (EC Broth)
貨號(hào) | 產(chǎn)品描述 | 規(guī)格 | 可配制培養(yǎng)基 |
CM0853B | EC肉湯，EC Broth | 500g | 13.5L |
CM0979A | EC肉湯(含MUG)，EC Broth with MUG | 100g | 2.7L |
CM0979B | 500g | 13.5L | |
CM0990B | EC肉湯(減少膽鹽)，EC Broth (Reduced Bile Sales) | 500g | 13.7L |
CM0990R | 2.5kg | 68.5L | |
SR0181E | 新生霉素添加劑 Novobiocin Supplement | 10小瓶 | 每小瓶500ml |
EC肉湯 CM0853
配方表：
成分* | 含量 g/L |
胰蛋白胨 | 20.0 |
乳糖 | 5.0 |
3號(hào)膽鹽 | 1.5 |
磷酸二鉀 | 4.0 |
磷酸鉀 | 1.5 |
**鈉 | 5.0 |
pH 6.9±0.2 @25℃ |
*可根據(jù)操作標(biāo)準(zhǔn)自行調(diào)整配方
制備方法：
取37g培養(yǎng)基至1L蒸餾水中，分裝至最終容器中，121℃高壓滅菌15分鐘。
產(chǎn)品描述：
EC肉湯用于食品和環(huán)境中大腸桿菌的篩選。也適用于牛奶和奶制品中大腸桿菌的計(jì)數(shù)。
大腸桿菌普遍存在于食品和環(huán)境中，為革蘭氏陰性菌。大腸桿菌可用來(lái)指示糞便的污染，雖然一定的攝取量無(wú)害，然而，某些菌株可導(dǎo)致腹瀉，甚至可引起更嚴(yán)重的疾病。
大腸桿菌的分離鑒定利用大腸桿菌在44-45.5℃的條件下培養(yǎng)24-48小時(shí)乳糖被降解產(chǎn)氣，培養(yǎng)溫度取決于培養(yǎng)方法或者樣本來(lái)源：
貝類 44.5℃
牛奶和牛制品44.0℃
水和污水 44.5℃
其他食物 45.5℃
EC 肉湯中含有乳糖緩沖肉湯和膽鹽3 號(hào)。膽鹽的存在能夠抑制孢子和腸球菌的生長(zhǎng)，但是大腸桿菌能夠生長(zhǎng)。
制成培養(yǎng)基最多保存4周。
EC肉湯（含MUG） CM0979
配方表：
成分* | 含量 g/L |
胰蛋白胨 | 20.0 |
乳糖 | 5.0 |
3號(hào)膽鹽 | 1.5 |
磷酸二鉀 | 4.0 |
磷酸鉀 | 1.5 |
**鈉 | 5.0 |
4-methylumbelliferyl-?-D-glucuronide (MUG) | 0.05 |
pH 6.9±0.2 @25℃ |
*可根據(jù)操作標(biāo)準(zhǔn)自行調(diào)整配方
制備方法：
取37g培養(yǎng)基至1L蒸餾水中，分裝至含有杜氏小管的最終容器中，121℃高壓滅菌15分鐘。
產(chǎn)品描述：
β-葡萄糖苷酶是大腸桿菌的高度特異性的酶，研究表明90%的從環(huán)境中分離的大腸桿菌是β-葡萄糖苷酶陽(yáng)性。這款培養(yǎng)基中添加的高度靈敏的底物4-methylumbelliferyl-?-D-glucuronide (MUG)與β-葡萄糖苷酶反應(yīng)，生成4-methylumbelliferone ，在366nm紫外下顯綠色/藍(lán)色熒光。
含有MUG的EC肉湯是被FDA/BAM認(rèn)可的培養(yǎng)方法，用于從貝類和肉類中確認(rèn)大腸桿菌。
注意事項(xiàng)：
確保使用的玻璃容器不會(huì)產(chǎn)生熒光，正確使用紫外燈以確保安全。
一些病原菌，特別是大腸桿菌O157：H7一般是葡萄糖苷酶陰性，在這種測(cè)試中會(huì)產(chǎn)生不正確的結(jié)果。
其他腸桿菌比如變形桿菌也葡萄糖苷酶陽(yáng)性。
EC肉湯（減少膽鹽） CM0990
配方表：
成分* | 含量 g/L |
胰蛋白胨 | 20.0 |
乳糖 | 5.0 |
3號(hào)膽鹽 | 1.12 |
磷酸二鉀 | 4.0 |
磷酸鉀 | 1.5 |
**鈉 | 5.0 |
pH 6.9±0.2 @25℃ |
*可根據(jù)操作標(biāo)準(zhǔn)自行調(diào)整配方
制備方法：
取18.3g培養(yǎng)基至500ml蒸餾水中，121℃高壓滅菌15分鐘。冷卻到50℃添加已經(jīng)按照說(shuō)明書(shū)溶解的1小瓶SR0181E。
產(chǎn)品描述：
新生霉素可以抑制革蘭氏陽(yáng)性菌，比如金黃色葡萄球jun（包括耐甲yang西林的），以及其他葡萄球菌。有一些革蘭氏陰性菌包括流血嗜血桿菌，奈瑟氏菌，一些變形桿菌也同樣對(duì)新生霉素敏感，但是大部分腸桿菌對(duì)新生霉素耐受。
EC肉湯（減少膽鹽）可以對(duì)食品和環(huán)境樣品中，特別是冰凍樣品中的大腸桿菌O157進(jìn)行增菌培養(yǎng)。添加新生霉素SR0181E可以增加選擇性。培養(yǎng)基中這種濃度的膽鹽可以抑制孢子和腸球菌，但是不影響大腸桿菌O157的生長(zhǎng)，在37℃時(shí)。新生霉素的添加量是20mg/L。
Oxoid山li醇麥康凱瓊脂，改良TSB,EC肉湯等
