QIAGEN試劑盒操作過(guò)程看似簡(jiǎn)單，但稍不注意都會(huì)影響到試驗(yàn)效果，QIAGEN試劑盒在試驗(yàn)過(guò)程中，關(guān)鍵的步驟有哪些呢?小編為您揭曉。

　　一、重要的洗滌

　　不充分的洗滌會(huì)導(dǎo)致差異和高背景，從而帶來(lái)不理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如果未結(jié)合的材料殘留在微孔板中，那么它會(huì)增加背景噪音。有必要的話(huà)，可增加洗滌液中的鹽濃度，這會(huì)阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。如果背景過(guò)高，懷疑洗滌不夠時(shí)，可以嘗試增加洗滌次數(shù)。

　　二、QIAGEN試劑盒檢測(cè)試劑要適量

　　切勿使用過(guò)多的QIAGEN試劑盒。如果濃度過(guò)高，或者未正確稀釋?zhuān)瑒t會(huì)導(dǎo)致高背景。也不要顯色過(guò)度，如有必要，優(yōu)化一下何時(shí)應(yīng)加入終止液。

　　三、抗體濃度須優(yōu)化

　　如果試劑稍有不同，則可能需要優(yōu)化抗體的量。非特異的抗體結(jié)合會(huì)增加背景。為了防止這一點(diǎn)，切勿使用過(guò)多的一抗或二抗。

　　四、關(guān)鍵的封閉

　　封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點(diǎn)。這就降低了可產(chǎn)生信號(hào)的抗體非特異結(jié)合的機(jī)會(huì)。如果背景過(guò)高，懷疑封閉不充分，那么可以嘗試使用更高濃度的封閉液，或適當(dāng)延長(zhǎng)封閉時(shí)間。

　　目前主要有兩種類(lèi)型的封閉液：蛋白和非離子型去污劑。使用的類(lèi)型須取決于多個(gè)因素，包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、抗體和檢測(cè)試劑。好的封閉液應(yīng)降低非特異性結(jié)合，但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測(cè)試劑發(fā)生相互作用。

　　保證以上四個(gè)步驟不出錯(cuò)，可以讓QIAGEN試劑盒發(fā)揮的作用。